| Tesis Doctorales de la Universidad de Alcalá |
| EVALUACIÓN DE LA IMPORTANCIA DE LOS NIVELES SÉRICOS DE CITOQUINAS Y NANOPARTÍCULAS EN LA MONITORIZACIÓN DE LA ENFERMEDAD DE CROHN | | Autor/a | Castro Martínez, Patricia de | | Departamento | Biología de Sistemas | | Director/a | González Guijarro, Luis A. | | Codirector/a | Ortega Núñez, Miguel Ángel | | Fecha de defensa | 22-07-2026 | | Calificación | Sobresaliente cum laude | | Programa | Ciencias de la Salud (RD 99/2011) | | Mención internacional | No | | Resumen | Antecedentes: La enfermedad de Crohn (EC) es un trastorno inflamatorio crónico del tracto gastrointestinal con respuesta inmunitaria desregulada y evolución clínica heterogénea. Aunque los anti-TNF infliximab (IFX) y adalimumab (ADA) han mejorado su tratamiento, siguen siendo frecuentes la falta de respuesta primaria, la pérdida de eficacia, la inmunogenicidad y la persistencia de inflamación. Esto subraya la necesidad de biomarcadores que permitan optimizar la monitorización terapéutica, evaluar la actividad de la enfermedad y avanzar hacia una medicina personalizada. En este contexto, los marcadores inflamatorios sistémicos, las citoquinas circulantes y las firmas proteómicas en vesículas extracelulares pueden aportar información complementaria sobre respuesta al tratamiento y mecanismos inmunitarios.
Pacientes y métodos: Se realizaron tres estudios complementarios en pacientes con EC. El primero, prospectivo multicéntrico (54 semanas), evaluó pacientes con EC activa tratados con IFX o ADA, analizando eficacia clínica, farmacocinética, inmunogenicidad y biomarcadores inflamatorios. La actividad se midió mediante CDAI y se monitorizaron niveles de fármaco, anticuerpos antifármaco, TNFα, PCR, fibrinógeno y parámetros hematológicos. El segundo estudio analizó el perfil sérico de 18 citoquinas/quimioquinas en pacientes tratados con ADA durante 54 semanas mediante tecnología multiplex, con análisis de clustering, redes de correlación y curvas ROC para identificar firmas asociadas a actividad inflamatoria. El tercer estudio caracterizó vesículas extracelulares circulantes, incluyendo fracciones enriquecidas en exosomas, aisladas de suero de pacientes con EC y controles sanos mediante cromatografía de exclusión por tamaño y análisis bioquímicos, microscópicos y proteómicos, junto con análisis funcionales e interacción proteína-proteína.
Resultados: ADA se asoció con mayores tasas de remisión clínica y menor pérdida de respuesta que IFX a las 54 semanas, junto con una mayor normalización del fibrinógeno. La inmunogenicidad fue más frecuente con IFX, apoyando su papel en el fracaso terapéutico. El fibrinógeno se correlacionó con actividad de la enfermedad y discriminó entre fases activa y remisión, especialmente en pacientes tratados con ADA. El análisis de citoquinas mostró heterogeneidad inmunológica, con firmas Th1-like y Th17-like asociadas a enfermedad activa. Una firma compuesta por IL-1β, IL-7 y GM-CSF mostró mejor capacidad discriminativa que los marcadores clásicos.
El análisis de vesículas extracelulares reveló heterogeneidad funcional: las fracciones tempranas estaban enriquecidas en proteínas de adhesión y organización del citoesqueleto, mientras que las tardías mostraron enriquecimiento en inmunidad innata, complemento, coagulación y opsonización. En EC, el contenido vesicular se desplazó hacia perfiles inmunitarios, incluyendo CD14, proteínas del complemento y de fase aguda.
Conclusiones: La monitorización de la EC requiere un enfoque multidimensional basado en biomarcadores combinados. La farmacocinética de anti-TNF, el fibrinógeno, las firmas de citoquinas y la proteómica de vesículas extracelulares aportan información complementaria sobre actividad inflamatoria, respuesta terapéutica, inmunogenicidad y remodelado inmunitario sistémico. Estos resultados respaldan el potencial de biomarcadores compuestos para mejorar la estratificación de pacientes y la medicina personalizada en EC, siendo necesaria su validación en cohortes independientes con integración de datos clínicos, endoscópicos y bioquímicos. |
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