| Tesis Doctorales de la Universidad de Alcalá |
| EL VIRUS SULFOLOBUS SPINDLE-SHAPED VIRUS 8 (SSV8) ACTÚA COMO FACTOR DE ESTRÉS EN SULFOLOBUS SOLFATARICUS P2 Y REGULA AL ALZA LA PRODUCCIÓN DE PROTEÍNAS DE CHOQUE TÉRMICO (HSP) | | Autor/a | Bueno Prieto, Jorge Enrique | | Departamento | Automática | | Director/a | Parro García, Víctor | | Codirector/a | Ceballos Rubén, Michael | | Fecha de defensa | 21-04-2023 | | Calificación | Aprobado | | Programa | Investigación Espacial y Astrobiología (RD 99/2011) | | Mención internacional | No | | Resumen | Las proteínas de choque térmico (HSP) están presentes en organismos de Archaea, Bacteria y
Eukarya y están altamente reguladas como respuesta al estrés por aumento en la temperatura.
Además, son responsables del plegamiento de proteínas sintetizadas y replegamiento de
proteínas mal plegadas o desnaturalizadas teniendo así una función reguladora del equilibrio
proteico en la célula. En el dominio Archaea estas chaperoninas se denominan grupo Archaeal II
y se encuentran entre las proteínas expresadas con mayor abundancia en los sulfolobales.
Los complejos de HSP son estructuras octadecámeros de doble anillo no américo compuestas por
uno o más subunidades: HSPalfa, HSPbeta y HSPgama. En condiciones de estrés por choque térmico,
HSPalfa y HSPbeta son las principales subunidades implicadas en la formación y función del
complejo.
En esta investigación se estudiaron las consecuencias del estrés por infección viral en
organismos del género Sulfolobus, tomando como modelo hospedero a Sulfolobus Solfataricus
P2 y el agente viral a Sulfolobus Spindle-Shape Virus 8 SSV8 (a.k.a SSVRH), buscando
determinar si la expresión de HSP está regulada por la infección por SSV. Usando métodos en rtqPCR,
electroforesis en gel y cuantificación de proteínas (ensayo de Bradford). Los datos
indican que bajo una temperatura de crecimiento óptima fisiológica de 76 ° C, la expresión tanto
de HSPalfa como de HSPbeta fue similar; sin embargo, en condiciones de choque térmico (85 ° C
durante 30 min), se observó expresión de HSPbeta a concentraciones más altas que HSPalfa y el
control fisiológico HSPbeta (76 ° C). A 76 ° C y 24 horas después de la infección (HPI) con SSV8,
se observó que ambas subunidades de HSP estaban en una concentración intracelular más baja
que los controles no infectados.
Después de 48 HPI con SSV8 a 76 ° C, la expresión de ambos subtipos de HSP fue equivalente a
los controles no infectados a la misma temperatura fisiológica. Teniendo en cuenta que hay
menos células vivas en un momento determinado después de la infección (frente a los controles
no infectados), la concentración de HSP equivalente sugiere que hay una regulación positiva de
la expresión de HSP durante la infección a 76 ° C, destacando una ratio alta de los genes de
HSPbeta sobre HSPalfa.
En base a estos resultados reportados por primera vez, está claro que la cepa de Sulfolobus
solfataricus P2 responde a la infección por SSV8 regulando al alza la expresión de HSP tanto en
condiciones fisiológicas como de choque térmico.
En general, estos datos sugieren que las chaperoninas del grupo II y los complejos HSP
desempeñan un papel en la dinámica de la infección del huésped SSV. La caída repentina en la
expresión de HSP al principio de la dinámica de la infección sugiere que los recursos
metabólicos del huésped se han redirigido; sin embargo, más adelante en el ciclo de la infección,
la expresión de HSP celular se recupera.
Queda por examinar si los complejos de HSP protegen las proteínas nativas durante la infección
por SSV o ayudan en el plegamiento de las proteínas virales. Por lo anterior, se puede también
sugerir que el incremento de HSP ante la infección por SSV es la respuesta al aumento de
proteínas virales en el citoplasma de Sulfolobus las cuales podrían llegar a ser identificadas como
un posible exceso proteico de la célula activando así la función proteico-reguladora de las HSP
para mantener el equilibrio de proteínas del hospedador, aunque esto debe ser objeto de
investigaciones subsecuentes. |
|
