| Tesis Doctorales de la Universidad de Alcalá |
| ESTUDIO EXPERIMENTAL ALEATORIZADO SOBRE LA EFICACIA DE LA PRESERVACIÓN RENAL HIPOTÉRMICA EN MÁQUINA CON SUPLEMENTACIÓN DE OXÍGENO | | Autor/a | Hevia Palacios, Vital | | Departamento | Biología de Sistemas | | Director/a | Burgos Revilla, Francisco Javier | | Codirector/a | Gómez Dos Santos, María Victoria | | Fecha de defensa | 06/07/2022 | | Calificación | Sobresaliente Cum Laude | | Programa | Ciencias de la Salud (RD 99/2011) | | Mención internacional | No | | Resumen | Hasta la fecha, la eficacia y la seguridad del empleo de altas concentraciones de oxígeno (O2) durante la perfusión hipotérmica en máquina (PHM) no han sido establecidos. En este estudio se investiga el impacto de la administración de altas concentraciones de O2 durante la PHM en un modelo porcino de donación en asistolia (DA), tanto en términos de función renal como sus efectos metabólicos y bioquímicos.
Material y Métodos
Estudio de cohorte prospectivo aleatorizado y no ciego en un modelo porcino de autotrasplante que imita las condiciones de la DA de tipo III de Maastricht, en condiciones de PHM con suplemento de oxígeno (PHMO) comparadas con la PHM sin oxígeno (PHM) en el dispositivo LifePort®. El objetivo primario fue la función renal post-trasplante, mientras que los objetivos secundarios fueron los cambios en la dinámica de la perfusión, la lesión celular medida por los niveles de lactato deshidrogenasa (LDH) y lactato en el líquido de preservación, la peroxidación lipídica en las biopsias renales, la transición epitelio-mesenquimal (TEM) y la expresión de genes oxidativos en los cultivos celulares, la generación de ATP medida por el test SeaHorse en los cultivos celulares, la expresión de miRNA en la solución de preservación y por último el examen histológico.
Resultados
La generación de ATP y el estrés oxidativo, medidos por la peroxidación lipídica, aumentaron simultáneamente tras la isquemia caliente en el grupo PHMO. La PHMO no mostró un efecto beneficioso significativo sobre la función renal o la supervivencia de los animales. Se observó un claro aumento de la peroxidación lipídica en el grupo PHMO, que también dio lugar a una mayor expresión de los genes responsables de las enzimas antioxidantes superóxido-dismutasa-1 (SOD-1) y catalasa. La disfunción de la cadena respiratoria se mantuvo en el grupo PHMO con una disminución de la producción de ATP, un aumento de la fuga de protones y una disminución de la reserva respiratoria. En cuanto a la TEM, también se observó un aumento de la expresión de los genes de vimentina, fibronectina y colágeno en el grupo PHMO. Por último, se modificaron significativamente los niveles de expresión de miR-101 y miR-126, relacionados con las funciones características del epitelio tubular.
Conclusiones
Aunque se observó una tendencia hacia una mejor función renal y supervivencia en el grupo PHMO, su estudio metabólico reveló una menor eficiencia de la cadena respiratoria y un incremento del estrés oxidativo que se tradujeron en un aumento de la expresión de genes de TEM, lo que podría conducir a un aumento de la fibrosis renal. El diferente perfil de miRNA asociado a la PHMO podría ser expresión de un diferente metabolismo celular subyacente. Todo ello hace que, en la actualidad, la PHMO no pueda ser considerada una práctica estándar y su papel en la preservación renal deba ser aclarado. |
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