| Tesis Doctorales de la Universidad de Alcalá |
| SELECCIÓN Y CARACTERIZACIÓN DE APTÁMEROS FRENTE A LA HISTONA ACETILTRANSFERASA 1 (HAT1). POTENCIAL USO TERAPÉUTICO EN CÁNCER DE PULMÓN | | Autor/a | Klett Mingo, Jose Ignacio | | Departamento | Biología de Sistemas | | Director/a | González Muñoz, Víctor Manuel | | Directores/as | Martín Palma, María Elena; Toledo Lobo, María del Val | | Fecha de defensa | 27/04/2022 | | Calificación | Sobresaliente Cum Laude | | Programa | Señalización Celular (RD 99/2011) | | Mención internacional | No | | Resumen | El cáncer de pulmón es una de las principales causas de muerte a nivel mundial y
el más común entre todos los tipos de cáncer. A pesar de los avances científicos de los
últimos años, que han permitido el desarrollo de nuevos abordajes diagnósticos y
terapéuticos, la búsqueda de nuevos tratamientos y de un diagnóstico precoz de la
enfermedad siguen siendo una necesidad absoluta en oncología. Es por ello que
encontrar marcadores tumorales con valor pronóstico o de utilidad en la evaluación de
la respuesta a la terapia, se hace imprescindible en la lucha oncológica.
La Histona Acetiltransferasa 1 (HAT1) pertenece a la familia de enzimas HATs. De
hecho, fue la primera que se describió dentro de este grupo, aunque es la más
desconocida. Sin embargo, en los últimos años ha despertado un interés creciente
debido a su implicación en múltiples patologías. La sobreexpresión de esta enzima está
relacionada, entre otras, con infecciones virales, enfermedades inflamatorias, y cáncer,
donde está asociada a un mal pronóstico y una baja supervivencia. Así, muchos autores
proponen a HAT1 como una potencial diana terapéutica.
Los aptámeros son oligonucleótidos de ARN o ADN de cadena sencilla, obtenidos a
partir de librerías de oligonucleótidos por evolución sistemática de ligandos mediante
enriquecimiento exponencial (SELEX), que se estructuran con una conformación
tridimensional y se unen a una molécula diana con alta especificidad y afinidad. Esto los
hace postularse como candidatos excepcionales para su utilización como herramientas
de diagnóstico o como agentes antagonistas o agonistas de dianas terapéuticas, entre
otros.
En este trabajo se desarrollaron aptámeros frente a HAT1 con actividad inhibitoria.
Después de 6 rondas de selección, se obtuvieron 2 aptámeros específicos y afines
frente a esta diana, que posteriormente se caracterizaron y optimizaron. Ambos
aptámeros y una de sus secuencias modificadas reconocieron HAT1 con una alta
afinidad y especificidad, y fueron capaces de inhibir la actividad acetil transferasa de
HAT1, siendo los principales candidatos a mostrar actividad terapéutica. Además, los
estudios en cultivos celulares mostraron que el aptámero apHAT610 presenta una IC50
en el rango nanomolar en las 3 líneas celulares de cáncer de pulmón utilizadas,
induciendo apoptosis y parada en el ciclo celular, e inhibiendo la formación de colonias.
Además, también muestra efectos inhibitorios de la actividad HAT1, promoviendo tanto
una disminución de la acetilación de la histona H4 como de los niveles de HAT1. Todos
estos resultados postulan al aptámero apHAT610 en un potencial fármaco para el
tratamiento del cáncer de pulmón |
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