ESCUELA DE DOCTORADO

 
Tesis Doctorales de la Universidad de Alcalá
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SELECCIÓN Y CARACTERIZACIÓN DE APTÁMEROS FRENTE A LA HISTONA ACETILTRANSFERASA 1 (HAT1). POTENCIAL USO TERAPÉUTICO EN CÁNCER DE PULMÓN
Autor/aKlett Mingo, Jose Ignacio
DepartamentoBiología de Sistemas
Director/aGonzález Muñoz, Víctor Manuel
Codirectores/asMartín Palma, María Elena; Toledo Lobo, María del Val
Fecha de defensa27/04/2022
CalificaciónSobresaliente Cum Laude
ProgramaSeñalización Celular (RD 99/2011)
Mención internacionalNo
ResumenEl cáncer de pulmón es una de las principales causas de muerte a nivel mundial y el más común entre todos los tipos de cáncer. A pesar de los avances científicos de los últimos años, que han permitido el desarrollo de nuevos abordajes diagnósticos y terapéuticos, la búsqueda de nuevos tratamientos y de un diagnóstico precoz de la enfermedad siguen siendo una necesidad absoluta en oncología. Es por ello que encontrar marcadores tumorales con valor pronóstico o de utilidad en la evaluación de la respuesta a la terapia, se hace imprescindible en la lucha oncológica. La Histona Acetiltransferasa 1 (HAT1) pertenece a la familia de enzimas HATs. De hecho, fue la primera que se describió dentro de este grupo, aunque es la más desconocida. Sin embargo, en los últimos años ha despertado un interés creciente debido a su implicación en múltiples patologías. La sobreexpresión de esta enzima está relacionada, entre otras, con infecciones virales, enfermedades inflamatorias, y cáncer, donde está asociada a un mal pronóstico y una baja supervivencia. Así, muchos autores proponen a HAT1 como una potencial diana terapéutica. Los aptámeros son oligonucleótidos de ARN o ADN de cadena sencilla, obtenidos a partir de librerías de oligonucleótidos por evolución sistemática de ligandos mediante enriquecimiento exponencial (SELEX), que se estructuran con una conformación tridimensional y se unen a una molécula diana con alta especificidad y afinidad. Esto los hace postularse como candidatos excepcionales para su utilización como herramientas de diagnóstico o como agentes antagonistas o agonistas de dianas terapéuticas, entre otros. En este trabajo se desarrollaron aptámeros frente a HAT1 con actividad inhibitoria. Después de 6 rondas de selección, se obtuvieron 2 aptámeros específicos y afines frente a esta diana, que posteriormente se caracterizaron y optimizaron. Ambos aptámeros y una de sus secuencias modificadas reconocieron HAT1 con una alta afinidad y especificidad, y fueron capaces de inhibir la actividad acetil transferasa de HAT1, siendo los principales candidatos a mostrar actividad terapéutica. Además, los estudios en cultivos celulares mostraron que el aptámero apHAT610 presenta una IC50 en el rango nanomolar en las 3 líneas celulares de cáncer de pulmón utilizadas, induciendo apoptosis y parada en el ciclo celular, e inhibiendo la formación de colonias. Además, también muestra efectos inhibitorios de la actividad HAT1, promoviendo tanto una disminución de la acetilación de la histona H4 como de los niveles de HAT1. Todos estos resultados postulan al aptámero apHAT610 en un potencial fármaco para el tratamiento del cáncer de pulmón