| Tesis Doctorales de la Universidad de Alcalá |
| DEL ANTICUERPO AL DIAGNÓSTICO: MALT1, BCL6 Y PRDM1/BLIMP1 COMO MARCADORES DE NEOPLASIAS LINFOIDES HUMANAS | | Autor/a | Garcia Verdes-montenegro, Jose Francisco | | Departamento | Biología de Sistemas | | Director/a | Piris Pinilla, Miguel Ángel | | Codirector/a | Roncador , Giovanna | | Fecha de defensa | 11/07/2017 | | Calificación | Sobresaliente Cum Laude | | Programa | Señalización Celular (RD 99/2011) | | Mención internacional | No | | Resumen | En la actualidad, existe una necesidad creciente de identificar nuevos marcadores útiles para la comprensión de la biología de las neoplasias linfoides y que puedan tener un valor pronóstico y clínico en los pacientes. Los anticuerpos monoclonales se han convertido en las últimas décadas en una poderosa herramienta para la identificación de marcadores específicos en muestras de tejido y representan un valioso instrumento para la investigación, el diagnóstico y el pronóstico de estas enfermedades y están facilitando el progreso hacia una medicina personalizada de precisión.
En la presente Tesis Doctoral, se describe la producción, validación y caracterización de anticuerpos monoclonales frente a las proteínas BCL6, MALT1 y PRDM1/BLIMP1 para facilitar el estudio del papel que juegan estas proteínas clave en el desarrollo de los linfocitos reactivos y de las neoplasias linfoides humanas. Para su producción, además de metodologías de inmunización convencionales, se desarrolló un método alternativo, la inmunización genética: esta técnica facilitó la producción de los anticuerpos monoclonales específicos frente a las proteínas BCL6 y MALT1.
Comparando los anticuerpos frente a la proteína BCL6 generados por inmunización convencional (clones ST42B/H7 y PG-B6p) e inmunización genética (clon GI191E/A8), el clon GI191E/A8 presentó una mayor sensibilidad para detectar la expresión de la proteína, de manera más independiente de la fijación que los otros clones. Estas cualidades convierten al nuevo anticuerpo monoclonal GI191E/A8 en una herramienta de gran valor en el diagnóstico de las neoplasias linfoides.
Por su parte, el anticuerpo monoclonal producido frente a la proteína MALT1, clon RON169, permite detectar de forma específica la proteína MALT1 por western blotting e inmunoprecipitación. Esta habilidad ofrece múltiples aplicaciones en la investigación de las neoplasias linfoides.
Finalmente, mediante la utilización del anticuerpo generado frente a la proteína PRDM1/BLIMP1, clon ROS, se ha descrito y documentado por primera vez la expresión de la proteína PRDM1/BLIMP1 a nivel celular en tejido normal y en neoplasias linfoides humanas. Se demuestra con ello su utilidad como marcador de la diferenciación terminal de los linfocitos B y de las células plasmáticas. PRDM1/BLIMP1 se expresa en la mayoría de los linfomas caracterizados por una diferenciación plasmacítica (mielomas, plasmacitomas, linfomas linfoplasmacíticos, linfomas plasmablásticos de tipo de mucosa oral y linfomas difusos B de célula grande [LDBCG] con morfología inmunoblástica). También se detectó su expresión en el 43% de los LDBCG, 41% de los linfomas de Hodgkin, 23% de los linfomas T y en un subgrupo de leucemias linfocíticas crónicas (15%). Por último, destacar que la expresión de PRDM1/BLIMP1 se correlacionó con una menor supervivencia libre de fallo en LDBCG, por lo que tiene además un interés como marcador pronóstico.
Por todo ello, estos nuevos anticuerpos monoclonales específicos frente a las proteínas MALT1, BCL6 y PRDM1/BLIMP1 representan herramientas de gran interés como marcadores de neoplasias linfoides humanas para la investigación y el diagnóstico y pronóstico de estas enfermedades. Fruto de este interés, los tres anticuerpos monoclonales han sido licenciados en algunas de las más prestigiosas compañías internacionales que comercializan este tipo de herramientas (Anexo 1). |
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